1.实验原理：

      RNA 干扰（RNA interfering，RNAi）现象是由与靶基因序列同源的双链 RNA（double-stranded RNA，dsRNA）引发的广泛存在于生物体内的序列特异性基因转录后的沉默过程。细胞中的核糖核酸酶 III 家族成员之一的，dsRNA 特异性的核酸酶 Dicer 将 dsRNA 裂解成由 21-25 个核苷酸组成的小干扰 RNA(small interfering RNA，siRNA)，随后 siRNA 作为介导子引起特异性地降解相同序列的 mRNA，从而阻断相应基因表达的转录后基因沉默机制。

2.技术原理示意图：

3.技术应用 ：

       使用瞬时转染/感染可观察外源基因表达后较短时间内就能检测的细胞功能，如CCK8，Transwell等，即在转染后24至96小时内收获细胞进行相关检测。

4.实验流程：

贴壁细胞转染程序以（6孔板）

4.1细胞铺板。细胞密度达到 60-80%时进行转染；

4.2实验开始前细胞换1mlOpti-mem培养基。

4.3复合物的制备及转染

1) 使用前将转染试剂轻轻混匀；

2) 直接将适量的siRNA与转染试剂直接混合后，用移液器吸吹混匀，静置 5min，再将复合物均匀加入 6孔板中；

3) 37℃静置培养细胞，6-8 h 后换液。36-72 h 检测 mRNA 或蛋白水平的表达。

5.结果图示：

Q-PCR检测结果：

WB检测结果：

5.客户提供：

       样品：细胞株（冻存管/培养细胞），目的蛋白抗体

       数据信息：目的基因的NIBI登录号、目的基因信息、细胞培养信息

6.辉园苑提供：

       WB鉴定报告，QPCR鉴定报告